輔酶Q10(CoQ10)檢測試劑盒(比色法)
一、產品簡介:
輔酶Q(CoenzymeQ,CoQ)是一種生物體內廣泛存在的脂溶性醌類化合物,故又稱泛醌,在體內呼吸鏈中質子移位及電子傳遞中起重要作用,是呼吸鏈中重要的遞氫體,它是細胞呼吸和細胞代謝的激活劑,也是重要的抗氧化劑和非特異性免疫增強劑。對多種酶有激活作用。不同生物體來源的輔酶Q其側鏈異戊烯單位的數目不同,人類和哺乳動物是10個異戊烯單位,故稱輔酶Q10。輔酶Q10是輔酶Q類的重要成員之一,它們與線粒體內膜相結合,廣泛參與體內的生物代謝過程。輔酶Q10不僅能給心臟提供動力,還具的抗氧化,清除自由基功能,能預防血管壁脂質過氧化,預防動脈粥樣硬化,并且無任何毒副作用。具體作用體現在以下四個方面:
①幫助保護心臟輔酶Q10有助于為心肌提供充足氧氣,預防突發性心臟病,尤其在心肌缺氧過程中輔酶Q10發揮關鍵性改善作用。
②保護皮膚長期使用輔酶Q10能夠有效防止皮膚衰老,減少臉部皺紋。
③抗疲勞輔酶Q10使細胞保持良好健康的狀態,因而機體充滿活力,精力旺盛,腦力充沛。它是細胞自身產生的天然抗氧化劑和細胞代謝啟動劑,具有保護和恢復生物膜結構的完整性、穩定膜電位作用,是機體的非特異性免疫增強劑,因此顯示出抗疲勞作用。
④防癌抗癌研究表明,輔酶Q10有抗腫瘤作用,臨床對于晚期轉移性癌癥有一定療效。
雅吉生物輔酶Q10(CoQ10)檢測試劑盒(比色法)其檢測原理是待測樣品在堿性條件下,EC取代了CoQ10上的甲氰基,形成藍色化合物,通過分光光度計或酶標儀測定620nm處吸光度值,根據標準曲線即可測出輔酶Q10的含量。本產品可用于測定花生、牛肉、沙丁魚、保健品等食品中的CoQ10的含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
二、產品組成:
名稱規格 | 50T | 存儲 |
試劑(A):CoQ10標準(5mg/ml) | 0.5ml | -20℃避光 |
試劑(B):EC solution | 25ml | RT避光 |
試劑(C):EC buffer | 100ml | RT |
試劑(D):CoQ10 Assay buffer | 25ml | RT |
使用說明書 | 一份 |
三、自備材料:
1、無水乙醇
2、比色杯或96孔板
3、分光光度計或酶標儀
四、操作步驟(僅供參考):
1、稀釋標準品:用EC buffer稀釋CoQ10標準(5mg/ml)至0.5mg/ml,
-20℃保存備用。
2、準備樣品:取新鮮動物心臟或肝臟等樣品,采用醇堿皂化法、溶劑皂化法等提取適量的CoQ10提取液,-20℃保存備用。
3、CoQ10加樣:按照下表設置空白、標準和測定,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡。如果樣品中的CoQ10濃度過高,可適當減少樣品用量或用EC buffer稀釋后再進行測定。
普通分光光度計(2ml比色杯)CoQ10測定 | |||
加入物(ml) | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
EC buffer | 2 | 1.75 | 1.75 |
CoQ10標準(0.5mg/ml) | — | 0.25 | — |
待測樣品(提取液) | — | — | 0.25 |
EC solution | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
CoQ10 Assay buffer | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
酶標儀CoQ10測定 | |||
加入物(μl) | 空白孔 | 標準孔 | 待測孔 |
EC buffer | 200 | 175 | 175 |
CoQ10標準(0.5mg/ml) | - | 25 | - |
待測樣品(提取液) | - | - | 25 |
EC solution | 50 | 50 | 50 |
CoQ10 Assay buffer | 50 | 50 | 50 |
4、CoQ10測定:混勻,室溫避光孵育3~5min,以空白管調零,比色杯光徑1cm,分光光度計或酶標儀600~640nm處測定標準管或測定管的吸光度。
計算:
液體樣品輔酶Q10濃度:CoQ10(mg/ml)=A測定/A標準×0.5
液體樣品輔酶Q10含量:CoQ10(mg)=A測定/A標準×0.5×VT
每100g固體樣品輔酶Q10含量:CoQ10(mg/g)=A測定/A標準×0.5×VT×100/m
式中:A測定=測定管的吸光度
A標準=標準管的吸光度
0.5=CoQ10標準的濃度(mg/ml)
VT=CoQ10提取液的總體積(ml)
m=樣品的實際用量(g)
注意事項:
1、待測樣品中不能含有CoQ10抑制劑,同時需避免反復凍融。
2、在皂化過程中,震蕩不要劇烈,以免形成乳化層。
3、CoQ10 Assay buffer 如果出現渾濁或絮狀物,應棄用。
4、CoQ10標準梯度應準確,盡量減少不必要的誤差。
5、EC solution有一定毒性,請小心操作。
6、檢測標準品時,按步驟3表格混合后,2min內即出現明顯的藍色變化并逐漸加深,20min后藍色開始變淺,30min 后逐漸呈黃綠色。620nm檢測數據表明,隨著時間的延長,OD值在不斷的下降,對應的顏色也已發生變化,特別是高濃度的標準品變化比較大。因此,應在出現最深的藍色結果且穩定的時間段內盡快檢測,而且建議每次同時檢測標準品(0.3~0.5mg/ml)和樣品。如有條件,最好用酶標儀檢測,減少因檢測時間導致的誤差。
7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:6 個月有效。
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