ELISA(酶聯免疫吸附測定)是一種常用的實驗技術,用于檢測和定量樣本中抗原或抗體的存在。其基本原理可以概括為以下幾個步驟:
包被抗原/抗體:在ELISA板的孔中涂敷已知的抗體(用于檢測抗原)或抗原(用于檢測抗體),并通過孵育使其結合到固相基質上。
樣本添加:將待測樣本(如血清、血漿或其他生物樣本)加入孔中。樣本中的目標抗原或抗體會與已包被的抗體或抗原結合。
洗滌:通過洗滌步驟去除未結合的成分,減少背景噪聲。
添加酶標記的二抗:加入一種與目標抗原或抗體特異性結合的酶標記的二抗。這種二抗會與樣本中結合的抗原或抗體結合。
再次洗滌:去除未結合的二抗。
底物反應:向孔中添加底物,底物與酶反應生成可測量的信號(通常是顏色變化)。信號的強度與樣本中目標物的濃度成正比。
結果測定:使用分光光度計等儀器測量反應產生的信號強度,從而定量分析樣本中目標物質的濃度。
ELISA技術因其靈敏度高、特異性強、操作相對簡單等優點,廣泛應用于臨床診斷、食品安全檢測、疫苗研發等領域。
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