1. 最新檢測方法
酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。此外小鼠ELISA試劑盒結果檢測還
包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。
一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP)
,而反應體系中添加有相應的底物(如3,3-二氨基聯苯胺DAB)。這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,
堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。
2. 分析抗體最新類型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA試劑盒,實際上有時候二者結合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進行捕獲而單抗
進行檢測有時更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
3. 交叉產生的反應
如果抗體間發生沖突或交叉反應就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個因素。
在用雙抗夾心法進行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應。如果檢測用二抗與捕獲抗體結合,
實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。
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