詳細介紹
總蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,對于生物體液(血清、尿液、腦脊液)中總蛋白質含量的測定,一般要基于
如下兩個假設:1、所有蛋白質分子由純多肽組成,含氮量的質量百分比為16%;2、體液中含有數百個蛋白質分子,
每個分子對測定反應都具有非常相似的特性,目前常用的檢測總蛋白的方法有:雙縮脲法、紫外分光光度法、染料結合法
、凱氏定氮法、沉淀法等。
總蛋白(雙縮脲比吸光度微板法)多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測定,雙縮脲反應的原理是在呈藍色的堿性硫酸銅溶液存在
的情況下,肽鍵與銅離子結合,生成藍紫色的化合物,此化合物在540nm的吸光度與肽鍵的數量呈正比例關系,
因此可計算出蛋白質的含量,雙縮脲法測蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離
子螯合劑的影響,另外對于血清總蛋白的雙縮脲分析,脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用,
雙縮脲法在5~160mg/ml濃度范圍內有較好的線性關系。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、取內徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。
2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動秒表計時,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內血液流動情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間,即為ACT。
4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。
計算:參考區間: (1.77±0.76)min
4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml。
注意事項:
1、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,應存于-20°C.
2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。
4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發現有絮狀物請棄用。
5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定。
6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。
7、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法。
總蛋白(雙縮脲比吸光度微板法)更多產品咨詢:
A3824-01Bst 4.0 LowSalt Mix
A3828-01Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)
A3824-01RBst 4.0 LowSalt Red LyoMix
A3828-01RBst 4.0 LowSalt Red Bead
A3824-02Bst 4.0 Basic Mix (液體預混)
A3828-02Bst 4.0 Basic Bead
A3824-03Bst 4.0 SYBR Green Mix
A3828-03Bst 4.0 SYBR Green Bead
A3828-04Bst 4.0 HNB Bead
A3824-05Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)
A3831-01HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可凍干)
A3831-00HotStart Bst 4.2 DNA/RNA Polymerase(無甘油)
A3831-03HotStart Bst 4.2 Basic Bead(基礎凍干球)
A3831-07HotStart Bst 3.2 DNA Polymerase(無甘油)
A3831-05HotStart Bst 4.2 Red Bead(紅黃變色凍干球)
A3831-06HotStart Bst 4.2 L-HNB Bead(紫綠變色凍干球)
A3831-20Oligo Lyophilized Solution (引物凍干劑)
A3824-02Bst 4.0 Basic Mix (液體預混)
A3828-21OG 橙綠變色管
LP1002COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set
LP2002COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set (探針法)
A2250RAPA3G SYBR Green qPCR Mix
A2259RAPA3G Probe qPCR Mix
A2262RAPA3G Probe qPCR MasterMix(with UDG)
A06012XSuper Taq PCR Mix(with Dye)
A06042XRAPA HiFi PCR Mix
A06052XRAPA HiFi PCR Mix(with dye)
A06062XRAPA3G全能PCR Mix
A06072XRAPA3G全能PCR Mix(with dye)
A0608RAPA3G植物組織直擴PCR試劑盒
A0609RAPA3G動物組織直擴PCR試劑盒
A06102×RAPA3G Multiplex PCR Mix
D0405HiFi One-Step RT-PCR Mix(電泳)
A3702RCA滾環擴增試劑盒
A3208-00 G5U Plus HiFi DNA Polymerase
A3208-01HotStart G5U Plus HiFi DNA Polymerase
A3208-02 G5U Plus HiFi PCR Mix
產品咨詢
技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml