詳細介紹
肌酐(creatinine,Cr)是人體或動物肌肉內代謝的產物,每20g肌肉代謝可產生約1mg肌酐,由腎小球濾過排出體外,外源性
肌酐是肉類食物在體內代謝后的產物,內源性肌酐是體內肌肉組織代謝的產物。
肌酐(Cr)檢測試劑盒(PA速率比色法)檢測原理是肌酐與鹽發生Jaffe反應,生成橘紅色的肌酐復合物,
該復合物生成量與肌酐含量呈正比,通過酶標儀測定510nm處吸光度,可用于檢測人體、動物的血漿、血清、尿液樣品中肌酐含
量。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、取內徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。
2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動秒表計時,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內血液流動情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間,即為ACT。
4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。
計算:參考區間: (1.77±0.76)min
4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml。
注意事項:
1、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,應存于-20°C.
2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。
4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發現有絮狀物請棄用。
5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定。
6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。
7、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法。
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