詳細介紹
甘油三酯(Triglyceride,TG)又稱三酰甘油或三油酸甘油酯,是三分子長鏈脂肪酸和一分子甘油形成的脂肪分子,是人體內含量
最多的脂類,大部分組織均可以利用甘油三酯分解產物供給能量,同時肝臟、脂肪等組織還可以進行甘油三酯的合成。目前,
檢測甘油三脂的常用方法有酶法和化學法。酶法測定具有簡便、快捷、微量且試劑穩定等優點,適用于手工和自動化測定。
化學法是使用異丙醇等不同的有機溶劑從血清中抽提出甘油三酯, 分層或者吸附去除磷脂等影響因素,再經皂化、氧化,
由顯色反應進行測定。目前的化學法是乙酰丙酮比色法,其中包括吸附抽提法和分溶抽提法。
甘油三酯(TG)檢測試劑盒(乙酰丙酮微板法)其檢測原理是組織勻漿液或血清中的甘油三脂經TG抽提液處理后,
甘油三脂被保留在上層,再經皂化生成甘油,后被氧化劑氧化成甲醛,甲醛與乙酰丙酮在銨根離子存在時,
發生縮合反應(Hantgsch反應),生成帶熒光的黃色物質即3,5-二乙酰-1,4-雙氫二甲基吡啶,用分光光度計在420nm處進行比色
測定,與相同處理的標準管對比計算其含量。本試劑盒可用于人或動物的血清、血漿、腦脊液等樣本中的甘油三脂含量的測定。
本方法所用試劑室溫下可保存半年以上,比較穩定,在0.25~11.44mg/ml(0.28~12.93mmol/L)之間有良好的線性關系,
檢測范圍較寬。本產品僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、取內徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。
2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動秒表計時,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內血液流動情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間,即為ACT。
4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。
計算:參考區間: (1.77±0.76)min
4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml。
注意事項:
1、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,應存于-20°C.
2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。
4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發現有絮狀物請棄用。
5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定。
6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。
7、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法。
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