詳細介紹
維生素C(Vitamin C)又稱L-抗壞血酸,是高等靈長類動物與其他少數生物的必需營養素,在生物體內維生素C是一種抗氧化劑,
為酸性己糖衍生物,是烯醇式己糖酸內酯,保護身體免于自由基的威脅,同時也是一種輔酶,其廣泛的食物來源為各類新鮮蔬果
。Vc有L-型和D-型兩種異構體,只有L-型的才具有生理功能,還原型和氧化型都有生理活性。
維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)檢測原理是在強酸和偏磷酸根離子存在條件下,鉬酸銨能與還原型維生素C反應生成
藍色化合物,在一定濃度范圍吸光度值與濃度呈線性關系,以分光光度計760nm處檢測吸光度,獲得Vitamin C含量。該試劑盒
主要用于植物組織中的還原型維生素C(抗壞血酸)的檢測,其優點是:1、反應迅速;2、操作簡便;3、還原糖及其他常見的還原
物質對實驗沒有干擾,專一性好。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、取內徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。
2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動秒表計時,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內血液流動情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間,即為ACT。
4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。
計算:參考區間: (1.77±0.76)min
4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml。
注意事項:
1、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,應存于-20°C.
2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。
4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發現有絮狀物請棄用。
5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定。
6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。
7、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法。
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