詳細介紹
天然果膠類物質以原果膠、果膠(Pectin)、果膠酸的形態廣泛存在于植物的果實、根、莖、葉中,是細胞壁的一種組成成分,
它們伴隨纖維素而存在,構成相鄰細胞中間層粘結物,使植物組織細胞緊緊黏結在一起。原果膠是不溶于水的物質,但可在酸
、堿、鹽等化學試劑及酶的作用下,加水分解轉變成水溶性果膠。果膠(Pectin)又稱多聚半乳糖醛酸,是由D-半乳糖醛酸以α-1,4
糖苷鍵連接形成的直鏈狀聚合物,本質上是一種線形的多糖聚合物,含有數百至約1000個脫水半乳糖醛酸殘基,
其相應的平均相對分子質量為50000~150000。
原果膠(PP)檢測試劑盒(咔唑微板法)檢測原理是果膠物質水解生成半乳糖醛酸,后者在硫酸溶液中與咔唑進行縮合
反應形成紫紅色的化合物,該化合物呈色強度與半乳糖醛酸濃度成正比,該化合物顏色在反應1~2h內呈色最深,當反應液顏色
最深時在波長530nm處測定吸光度,通過與標準曲線比較,計算出樣品中可溶性果膠含量。該試劑盒主要用于定量檢測植物組織
或果實中可溶性果膠含量,該50T試劑盒可以檢測50~60個樣品。該產品僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、取內徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。
2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動秒表計時,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內血液流動情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間,即為ACT。
4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。
計算:參考區間: (1.77±0.76)min
4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml。
注意事項:
1、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,應存于-20°C.
2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。
4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發現有絮狀物請棄用。
5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定。
6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。
7、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法。
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