詳細介紹
輔酶Q10(CoQ10)檢測試劑盒(比色法)是一種生物體內廣泛存在的脂溶性醌類化合物,故又稱泛醌,在體內呼吸鏈中質子移位及電子傳遞中起重要作用,是呼吸鏈中重要的遞氫體,它是細胞呼吸和細胞代謝的激活劑,也是重要的抗氧化劑和非特異性免疫增強劑。對多種酶有激活作用。不同生物體來源的輔酶Q其側鏈異戊烯單位的數目不同,人類和哺乳動物是10個異戊烯單位,故稱輔酶Q10。輔酶Q10是輔酶Q類的重要成員之一,它們與線粒體內膜相結合,廣泛參與體內的生物代謝過程。輔酶Q10不僅能給心臟提供動力,還具有的抗氧化,清除自由基功能,能預防血管壁脂質過氧化,預防動脈粥樣硬化,并且無任何毒副作用。具體作用體現在以下四個方面:
①幫助保護心臟輔酶Q10有助于為心肌提供充足氧氣,預防突發性心臟病,尤其在心肌缺氧過程中輔酶Q10發揮關鍵性改善作用。
②保護皮膚長期使用輔酶Q10能夠有效防止皮膚衰老,減少臉部皺紋。
③抗疲勞輔酶Q10使細胞保持良好健康的狀態,因而機體充滿活力,精力旺盛,腦力充沛。它是細胞自身產生的天然抗氧化劑和細胞代謝啟動劑,具有保護和恢復生物膜結構的完整性、穩定膜電位作用,是機體的非特異性免疫增強劑,因此顯示出抗疲勞作用。
④防癌抗癌研究表明,輔酶Q10有抗腫瘤作用,臨床對于晚期轉移性癌癥有一定療效。
雅吉生物輔酶Q10(CoQ10)檢測試劑盒(比色法)其檢測原理是待測樣品在堿性條件下,EC取代了CoQ10上的甲氰基,形成藍色化合物,通過分光光度計或酶標儀測定620nm處吸光度值,根據標準曲線即可測出輔酶Q10的含量。本產品可用于測定花生、牛肉、沙丁魚、保健品等食品中的CoQ10的含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
自備材料:
1、蒸餾水
2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管
3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板
操作步驟(僅供參考):
1、準備樣品∶
①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min
離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。
②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。
③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,
-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL
Lysis Buffer稀釋進行恰當的稀釋。
2、PAL加樣∶
取96孔板,按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并
注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,
求平均值。
加入物(μl)對照孔測定孔
蒸餾水150100
待測樣本5050
PAL Assay Buffer-50
3、PAL檢測︰
以對照孔為對照(調零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為 A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止
液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。
注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定
孔的吸光度。
注意事項∶
1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。
2、獲得上清液為PAL酶液,應盡快檢測,亦可-20°℃保存。
3、如果沒有可測定紫外區的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應注意比色杯的最小檢測體積。
4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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