詳細介紹
RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul)試劑 為采用電子重構架技術重組表達, 可高效的與RNase A/B/C形成1:1的復合物
,從而保護RNA免受降解。與野生型人源(human)、鼠源(murine)、豬源(porcine) Inhibitor比較來看,
該酶在如下幾方面得到明顯提升:(1)抗氧化/抗巰基類性能的提升,在0-10 mM DTT濃度下,活性無明顯差異,
因此不僅適用于PCR,也可適用于轉錄等高濃度DTT體系。(2)親和力得到明顯提升,在特定條件下可以抑制RNase,
從而長效保護體系中的RNA分子。(3)耐熱性顯著提高,在55°C條件下加熱10min后,仍然保留90%以上活性。
組分
組分名稱2000U40KU
RNaseOUT-RNase Inhibitor (40 U/μl)50 μl1 ml
單位定義
抑制5 ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量定義為一個活性單位。
儲存
-20°C可保存2年。
RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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