詳細介紹
rNTP Mixture(25 mM each)試劑500T目前國內大多數實驗室使用的普遍的核酸染料包括EB (溴化乙啶)、SYBR Green和GoldView,而這幾種染料在安全性、穩定性和靈敏性方面都存在著不可忽視的缺點。其中EB是目前使用泛的核酸染料,其靈敏度相對較高,但它是一種劇毒且具有高誘變性的化學物質,極大的危及實驗人員的身體健康;而SYBR Green穩定性差,在微堿性的電泳緩沖液中極易降解;市面上的GoldView則靈敏度較差,會影響實驗結果的真實性。為解決上述問題,?;邪l的全新一代EB替代染料-Safe Dye,安全、靈敏度高、穩定性好,使用Safe Dye EB替代染料配制而成的Loading Buffer和DNA Marker具有安全、靈敏度高、穩定性好、使用方便等優點。
使用Safe Dye EB替代染料時,在制膠過程中無需加入EB 、SYBR Green和GoldView等核酸染料,只需將DNA(PCR產物、質?;蚧蚪MDNA)與Loading Buffer充分混合即可進行凝膠電泳。由于Safe Dye EB替代染料的激發波長與EB激發光波長相同,故無需更換實驗設備。海基推出的Safe Dye真正實現了安全、靈敏度高、穩定性好的保證,成為真正的EB替代染料,是廣大實驗室工作人員的選擇。
主要特征
安全保證:是EB、SYBR Green、GoldView染料新型的代替物,經細胞學試驗證明Safe Dye EB替代物不能穿透細胞膜,具有極低的細胞毒性和誘變性。
高靈敏度:等于或稍高于EB,遠遠高于GoldView和SYBR Green。
使用方便:無需加入凝膠中,只需將DNA(PCR產物、質?;蚧蚪MDNA)或RNA與Loading Buffer充分混合即可進行凝膠電泳,電泳后可直接進行觀察。
簡化制膠過程:1min即可制備瓊脂糖凝膠。
由于該染料無需添加入凝膠中,使制備的凝膠可保存更長時間,從而節省凝膠的用量。
激發波長為300nm(或310nm),與EB激發光波長相同,無需更換實驗室設備。
穩定性高于EB、SYBR Green、GoldView,可長期儲存。
儲存
室溫避光長期保存,可保存兩年。
rNTP Mixture(25 mM each)試劑500T恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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