詳細介紹
全血/血漿/血清總RNA提取試劑盒是在TRIzol LS的基礎上改造而成,主要成分為TRIzol LS試劑。利用TRIzol LS中的高序鹽成分
,可使RNA結合于硅膠膜上,通過漂洗、洗脫即可獲得高純度RNA。該試劑盒專門用于血液、血漿/血清、病毒液等液體樣品,
可在最短的時間內獲得高純度的RNA。獲得的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析
、Northern Blot等實驗。
組分
名稱數量
TRIzol LS40 ml
Washing Buffer(已含乙醇)55 ml
Nuclease Free H2O10 ml
吸附柱50套
1.5 mL Nuclease Free收集管50個
(1) 本試劑盒中的Washing Buffer中已經加乙醇,無需單獨添加。
(2)TRIzol LS含有強變性劑,請勿直接于皮膚接觸或吞咽,若接觸到皮膚或眼睛請盡快到醫院處理。實驗時務必穿實驗服,
戴手套。
樣本量及RNA產量
樣本類型樣本用量RNA產量
人全血250 μl3~10 μg
血清/病毒液250 μl0.5~10 μg
儲存
2-8℃避光保存,可保存2年。
全血/血漿/血清總RNA提取試劑盒恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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