詳細介紹
DNA/RNA 腺苷化酶試劑全新升級的腺苷化酶,該酶能高效的將ssDNA或ssRNA的5’
磷酸基團腺苷化(該酶是已知的率的腺苷化酶)。通常該酶能將>95%的磷酸化底物轉化成腺苷化DNA(AppDNA)。
該酶極度耐熱,在60-95度下均有活性,高溫下的腺苷化反應有利于DNA/RNA的鏈舒展,提升底物的腺苷化比例,
并允許一些特殊的實驗開展,如NGS片段化后的腺苷化反應。組分
組分名稱數量
DNA/RNA Adenylatase (100 pmol/μl)20 μl/200 μl
10×Adenylatase Buffer0.5 ml
10 mM ATP100 μl
儲存
-20℃可保存3年。
DNA/RNA 腺苷化酶試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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