詳細介紹
Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer試劑對細胞有一定的裂解能力,能獲得較多的胞漿蛋白,而對細胞核的裂解能力有限,不能裂解細胞核,因此獲得的總蛋白適用于IP或CO-IP實驗;而WB Super RIPA Lysis Buffer對動物組織和細胞的裂解能力,它可以裂解細胞核和線粒體,并可提取到更多的膜蛋白,從而可獲得更多的總蛋白。因其強的裂解能力,使得大量的基因組DNA從細胞核中釋放出來,使蛋白變的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶消化可有效解決。經RIPA裂解液獲得得蛋白可用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度;使用Bradford法測定由本裂解液裂解所得到樣品的蛋白濃度會稍有誤差。
Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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