詳細介紹
蛋白酶抑制劑混合物ABC(100X)試劑貨號產品名稱組分數量保存溫度用途
S0143蛋白酶及磷酸酶抑制劑混合物ABC(100X)蛋白酶抑制劑混合物A(100X)100 μl用于非磷酸及磷酸化蛋白的研究
磷酸酶抑制劑混合物B(100X)100 μl
磷酸酶抑制劑混合物C(100X)100 μl
蛋白酶及磷酸酶抑制劑組分及抑制性能
蛋白酶抑制劑混合物A磷酸酶抑制劑混合物B磷酸酶抑制劑混合物C
組 分104mM AEBSF
80μM Aprotinin
5mM Bestatin
1.5mM E-64
2mM Leupeptin
1.5mM Pepstatin A100mM Sodium Fluoride
100mM Sodium Orthovanadate
400mM Sodium Tartrate
115mM Sodium Molybdate
200mM Imidazole2.5mM (-)-p-Bromotetramisole oxalate
500μM Cantharidin
500nM Microcystin LR, Microcystis aeruginosa
抑制蛋白酶種類Serine
Aminopeptidases Cysteine
Aspartic proteasesAcid phosphatases
Alkaline phosphatases
PTPs, ATPases,
Acid phosphatases
Acid and phosphoprotein
Alkaline phosphatasesAlkaline phosphatases
Ser/Thr phosphatases
PP1 and PP2A
根據試驗情況推薦選擇組合
試 驗 類 型組合類型選擇
Western Blot雜交,非磷酸化蛋白C2501+S0142
Western Blot雜交,非磷酸化及磷酸化蛋白C2501+S0143
Co-IP/IP試驗,非磷酸化蛋白C1901+S0142
Co-IP/IP試驗,非磷酸化及磷酸化蛋白C1901+S0143
單獨分離細胞核蛋白和胞漿蛋白C2601+S0143
使用方法
A: 非磷酸化蛋白的提?。涸谑褂们皵捣昼妰认騑B Super RIPA裂解液中,加入蛋白酶抑制劑混合物A (S0142),使其最終濃度為1×。如250μl WB Super RIPA裂解液,加入2.5μl蛋白酶抑制劑混合物A,混合均勻,進行后續樣品裂解和蛋白提取。
B: 磷酸化蛋白的提?。涸谑褂们皵捣昼妰认騑B Super RIPA裂解液中,加入蛋白酶抑制劑混合物A 、磷酸酶抑制劑混合物B 、磷酸酶抑制劑混合物C (S0143)各2.5μl,使其最終濃度為1×。如250μl WB Super RIPA裂解液,加入2.5μl蛋白酶抑制劑混合物A、2.5μl磷酸酶抑制劑混合物B 、2.5μl磷酸酶抑制劑混合物C,混合均勻,進行后續樣品裂解和蛋白提取。
蛋白酶抑制劑混合物ABC(100X)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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