ThermoStable dsAP Nuclease試劑 (耐熱dsAP核酸內切酶) 來源于嗜熱菌，是一種熱穩定的特異性識別雙鏈脫嘌呤/脫嘧(AP)位點的核酸內切酶。該酶可切割AP位點5’端的第一個磷酸二酯鍵，產生3′羥基和5′脫氧核糖磷酸末端(deoxyribose phosphate, dRP)。該酶作用底物為雙鏈DNA(含AP位點)，對單鏈DNA(含AP位點)、ssDNA、dsDNA無活性。該酶的最佳活性溫度為60-70°C，在85°C以上溫度逐步失活。

組分

單位定義

一單位指，在10µl反應體系中，60°C反應15min，切割1 pmol 含一個AP位點的寡核苷酸雙鏈，所需要的酶量。

儲存

置于-20°C，可保存2年。

ThermoStable dsAP Nuclease試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果，可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。

應用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略，在反應結束后，倒置反應管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現出醒目的綠色，陰性表現出橙色，區分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。

應用實例3：A3825-01 紅黃變色反應（肉眼觀察）

以 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起

始前，下圖為 65 度反應 30min 后。

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