詳細介紹
Rnase A(20mg/ml)試劑,不含DNase及蛋白酶,是一種核糖核酸內切酶,可特異性降解單鏈RNA的C及U殘基部位。它可以剪切核苷酸5'-核糖與相鄰的嘧核苷酸3'-核糖上所連磷酸基團間的磷酸二酯鍵,獲得的2', 3'-環狀磷酸鹽可進一步水解為相應的3'-核苷磷酸。該酶的濃度為20mg/ml,活力約1500U/ml。
單位定義
一個單位定義為在25°C、pH 5.0的條件下,催化水解RNA的一級反應速度常數為1.0時的RNase A量。
儲存
置于-20°C,可保存3年。該酶室溫也極其穩定。
使用注意事項
(1) 該酶對溫度不敏感,但最佳反應溫度為37°C。
(2) 該酶可在含有SDS的條件下發揮活性。
(3) 通常去除基因組DNA中的RNA污染的使用比例為1:200~1000。
(4) 使用前無需再加熱處理。
Rnase A(20mg/ml)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
雅吉生物是一家生物企業主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒更多產品歡迎咨詢。
產品咨詢
技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml