詳細介紹
ThermoStable FEN1試劑試劑熱穩定Flap核酸內切酶1催化切除分叉雙鏈DNA底物中的5'Flap結構,產生5'磷酸末端。FEN1消化產物可以經DNA連接酶而形成雙鏈DNA。在體內,FEN1是岡崎片段加工成熟的基本元件,并參與調控堿基切除修復過程。
單位定義
1單位指在20ul反應體系中,65℃的條件下,10分鐘切1pmol含5'flap結構的寡核苷酸底物所需要的酶量。
熱失活
否
儲存
置于-20°C可保存2年,避免反復凍融。
ThermoStable FEN1試劑試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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