詳細介紹
T4 GP44-62 Clamp loader protein試劑是來源于T4噬菌體基因組編碼的三大解旋酶之一,它為復制型解旋酶,
即解旋后可在DNA聚合酶(T4 gp43)的作用下引導DNA前導鏈的延伸。Gp41解旋酶屬于SF4解旋酶家族,
偏好5'-3'方向解旋;除解旋外, gp41還可與gp61 primase形成引發復合體引導滯后鏈的合成。
因此,gp41蛋白為DNA先導鏈和滯后鏈合成所必需,且這種gp41的這種特性在其loader gp59蛋白存在的情況下顯著增強。
Gp41是一種高進行型解旋酶,在ssDNA上的傳送速率為~500nt/s,解旋dsDNA的速率為~250bp/s。
本制品為經克隆后重組表達而得重組蛋白。
組分
組分名稱100 μg
T4 gp41 DNA helicase (0.5 μg/μl)100 μl
儲存
-20℃可保存3年。
T4 GP44-62 Clamp loader protein試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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