詳細介紹
熱穩定單鏈結合蛋白試劑熱穩定單鏈DNA 結合蛋白,是從極度耐熱的微生物中分離得到的單鏈DNA結合蛋白質,在95°C溫育60分鐘后,
依然具有全部活性。因為具有的熱穩定性,ET SSB可用于需要高溫反應條件的實驗中,如提高DNA聚合酶的延伸能力、
穩定和標記ssDNA結構、增加PCR反應的產量和特異性、增加RT-PCR中反轉錄的產量和延伸能力、改善強二級結構區域的DNA
測序。
組分
組分名稱200 μg
ET SSB Protein (1 μg/μl)200 μl
應用
提高 DNA 聚合酶的延伸能力
穩定和標記 ssDNA 結構
增加 PCR 反應的產量和特異性
改善強二級結構區域的 DNA 測序
儲存
-20℃可保存3年。
使用注意事項
(1) 該蛋白分子量為35kD。
(2) 該蛋白保存液含50%甘油。
(3) 通常50μl PCR的反應體系中可加入200ng。
熱穩定單鏈結合蛋白試劑試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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