詳細介紹
Tth RecA蛋白試劑蛋白是一種分離自嗜熱棲熱菌(Thermus aquaticus)的RecA同源蛋白。在最適溫度 65-75℃ 范圍內,
Tth RecA蛋白具有依賴于ssDNA的ATPase 活性。由于具有高的熱穩定性,對于需要高溫反應條件的分子生物學技術,
如核酸擴增和測序而言,Tth RecA 蛋白是一個較佳的選擇。
組分
組分名稱200 μg
Tth RecA Protein (2 μg/μl)100 μl
應用
電鏡分析 DNA 結構
D 環定點突變
用 RecA 蛋白包被的探針來進行文庫篩選
儲存
-20℃可保存3年。
使用注意事項
(1) 該蛋白分子量為36kD。
(2) 該蛋白保存液含50%甘油。
(3) 通常50μl PCR的反應體系中可加入400ng。
Tth RecA蛋白試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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