詳細介紹
15min高產基因組提取試劑盒采用的裂解液,可在15min內快速可靠的從抗凝全血樣本中純化出高純度的DNA,
最大限度的去除蛋白、色素、脂類等雜質污染。應用本試劑盒獲取的DNA純度高,無抑制劑,A260/A280為1.6-1.9。
應用本試劑盒提取的DNA可直接用于限制性酶切反應、PCR、文庫構建、Southern雜交等多種分子生物學實驗。
組分
組分名稱數量
紅細胞裂解液50 ml
gDNA LB16 ml
gDNA BB240 ml
Washing Buffer(已含乙醇)55 ml
蛋白酶K(20mg/ml)1 ml
DNA Elution Buffer10 ml
吸附柱50套
注意事項
(1) 本試劑盒中的Washing Buffer中已經加乙醇,無需單獨添加。
(2)gDNA LB1,儲存時可能會有白色結晶沉淀,放置于56℃水浴鍋溶解后,不影響使用效果。
(3)蛋白酶K(20 mg/ml)長期保存請儲存于-20℃,短期室溫保存(6個月),其它組分儲存于室溫。
儲存
室溫避光保存,可儲存兩年。
15min高產基因組提取試劑盒恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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