詳細介紹
ORF1ab LAMP Primer Set (探針法)試劑橙綠變色染料(OG Dye)以烘干的形式預加在八
聯管蓋上。本管用于 LAMP 擴增反應,當反應結束時,
將 0.2 ml EP 管顛倒,并溶解位于管蓋上的 OG 染料后。
LAMP 的反應產物將與 OG 染料形成綠色肉眼可見變色
反應(陽性),而未擴增的 EP 管為深橙色(陰性)。本試
劑管常溫長期保存。
保存:室溫避光儲存,2 年內有效。
使用注意事項:
在配制完 LAMP 反應體系后,輕彈 EP 管底部后,再蓋上
OG 橙綠變色管,蓋上管蓋后務必不能再劇烈混合與倒
置,以防止將管蓋上的 OG 染料溶解,OG 染料一旦混入
反應液中將會終止 LAMP 反應。
恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
應用實例2:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例3: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
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