詳細介紹
2XSuper Taq PCR Mix(with Dye)試劑該酶對dUTP具有強的識別能力,在配合熱敏UDG(該酶在95℃熱變性5min
不可逆失活,不影響后續PCR反應)的條件下能達到最佳的防污染能力。RAPA3G Probe qPCR MasterMix(with UDG)是將
化學修飾的熱啟動RAPA3G DNA聚合酶、反應Buffer、dNTP、UDG等試劑組成的預混試劑,該制品中的dTTP核酸堿基被
dUTP所取代,因此擴增產物均包含dUTP,在105 copies污染物的測試條件下,Ct可推遲15個以上(污染去除>99.997%),
因此該RAPA3G Probe qPCR MasterMix具有好的防核酸氣溶膠污染性能。
RAPA3G Probe qPCR MasterMix(with UDG)是一種2×濃度的單組分預混試劑,用于探針法定量PCR。該制品不含有ROX校正
染料,適用于各種熒光標記探針,并且適用于各種定量PCR機型。此外,該制品在多重定量PCR (MultiPlex qPCR)檢測表現
出色,至少可進行4重的定量PCR檢測。制品中的該酶經化學法修飾,在50℃以下100%無活性,只有95度條件下加熱5min后
才能恢復酶的活力。因此該系統可以有效抑制非特異性PCR擴增,極大的提高了PCR擴增特異性。
組分
包裝2×RAPA3G Probe qPCR Mix (with UDG)
A2262A1 ml
A2262B25 ml
主要特征
強的識別dUTP的能力,好的防污染能力。
RAPA3G DNA聚合酶強勁的擴增性能,可用于4重以上的qPCR擴增。
雜質高耐受性,使用各種gDNA和cDNA,具有最佳的擴增成功率。
高靈敏度,寬范圍的動態檢測(>7個數量級)。
反應效率在95-110%之間,高準確度和重現性。
擴增程序40min內完成,具有10s擴增1kb的快速能力。
在不同的富含AT和GC目標物上產生更高的熒光檢測。
應用
基因分型、RNA轉錄的cDNA、基因組DNA、病毒DNA等定量檢測。
儲存
請避光置于-20℃可保存3年。請避光置于-20℃以下可保存3年。該試劑經30次凍融后性能無下降,因此不使用時請置于-20℃避光保存。
2XSuper Taq PCR Mix(with Dye)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
應用實例2:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例3: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
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