詳細介紹
Therminator DNA Polymerase (2 U/μl)試劑來源于Thermococcus species 9°N-7中的一種,其是9°N DNA聚合酶突變體,無3’-5’ exo活性,該突變體具有較強的摻入修飾底物的能力,如:ddNTP、rNTP 和acyNTP,因此其適用于核糖核酸置換法DNA測序、ddNTP或acyNTP的鏈終止法測序或SNP分析。
主要特征和應用
提高了修飾核苷酸的摻入能力
部分核糖核酸置換法測定 DNA 序列
ddNTP 或 acyNTP 的鏈終止法用于測序或 SNP 分析
單位定義
一個活力單位即在在72°C條件下,30分鐘內催化10 nmol dNTP的摻入反應成為酸不溶性物質所需的酶量。
儲存
-20℃可保存2年。
Therminator DNA Polymerase (2 U/μl)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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