詳細介紹
TRIzol Reagent試劑是一種可用于提取動植物和細菌來源的組織或細胞RNA的制品。樣本在進行勻漿的過程中,
TRIzol Reagent能夠充分破壞細胞,裂解細胞內含物,同時可高效抑制RNA酶的活性,從而保持RNA的完整性。
TRIzol Reagent具有很強的廣譜性,可以適用于各種樣品的總RNA提取,提取過程方便快速,整個操作在一小時內便可以完成
。該試劑可用于小量樣品(20-100mg組織、1x106細胞)也適用于大量樣品(≥1g組織、>107細胞);
對人、動物、植物組織、細菌均適用,可同時處理大量不同樣品,整個提取過程在一小時內即可完成。
分離的總RNA無蛋白質和DNA污染,可用于Northern Blot、Dot blot、ployA篩選、體外翻譯、RNase保護分析和基因克隆。
樣品用量及RNA產量
樣本類型樣本量產量
白細胞1x106個10~20μg
植物材料25mg10~20μg
細胞1x106個8~15μg
肌肉/腦等組織50mg10~25μg
肝臟組織50mg100~300μg
儲存
2-8℃避光保存,可保存2年。
TRIzol Reagent試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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