詳細介紹
TRIzol LS Reagent試劑是一種專門用于從液體樣本(如細菌、病毒、酵母、血液、組織懸液)中提取高質量RNA的試劑。
與TRIzol Reagent相比,區別在于其組分濃度,TRIzol LS Reagent 是一種用于提取液體樣本RNA的濃縮試劑,
故提取相同量樣本所需的用量相對較少。TRIzol LS Reagent能夠充分裂解細胞,溶解細胞內含物,高效抑制RNA酶活性
,從而可保持RNA的完整性。提取過程方便快速,整個操作在一小時內便可以完成。
應用TRIzol LS Reagent獲得的總RNA無蛋白質和DNA污染,可用于Northern Blot、Dot blot、ployA篩選、體外翻譯、
RNase保護分析和基因克隆等后續分析。
樣本量及RNA產量
樣本類型樣本量產量
人全血250 μl3~10 μg
白細胞1x106個10~20 μg
細胞1x106個8~15 μg
肌肉/腦等組織25 mg10~25 μg
肝臟組織25 mg50~100 μg
儲存
2-8℃避光保存,可保存2年。
TRIzol LS Reagent試劑溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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