詳細介紹
Western一抗二抗去除液試劑,用于Western Blot 中轉印了蛋白的膜的重復利用。在Western Blot中完成了一 抗二抗結合和后續的化學發光檢測后,有時還需要檢測 Actin、Tubulin 等內參蛋白或檢測其它蛋白進行比較。通過使用Western一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白,與重新跑SDS-PAGE膠相比,不僅省時省力,而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強。海基生產的Western一抗二抗去除液可變性已經結合的抗體,使其失活,從而將同一張膜再用于其它抗體的雜交。與其它類型的一抗二抗去除液相比,該試劑不破壞抗原,處理過程中膜上抗原不丟失,因此可重復應用的次數更多、靈敏度更高。主要特征
操作簡單快速
對抗原蛋白作用溫和,不會造成抗原蛋白的損失
轉印膜至少可重復使用3~5次
應用
蛋白印記雜交膜(PVDF膜和NC膜)的再利用。
儲存
4°C保存,有效期1年。
Western一抗二抗去除液試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現出醒目的綠色,陰性表現出橙色,區分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后。
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